Анализ крови на сифилис: откуда берут, как называется, расшифровка общей диагностики

Как диагностировать сифилис?

Современная медицина знает множество способов обнаружить бледную трепонему, которая является возбудителем болезни, в крови человека. Эти методы разделяют на несколько больших групп:

1. В первой группе исследований — тесты, при которых в биоматериале ищут присутствие трепонемы. Для этого на исследования забирают материал из язв или пораженных болезнью органов.
2. Вторая, серологическая группа методов позволяет выявить косвенные следы присутствия трепонемы в организме. Здесь подразумеваются антитела, активной выработкой которых организм реагирует на инфекцию.

прямые тесты отлично работают при первых симптомах заболевания, серологические стоит проводить примерно через неделю после появления первой язвы. Иными словами, при подозрении на заражение лучше всего прибегнуть к тестам прямого типа.

Насколько серьезное заболевание сифилис?

Сифилис как инфекционное заболевание на сегодняшний день, к сожалению, остается одним из самых распространённых заболеваний как среди женщин, так и среди мужчин.

Возбудитель множества заболеваний, обозначающийся как Treponema pallidum, является и возбудителем для сифилиса. Когда инфекция попадает в организм человека, она способна постепенно воздействовать на все органы без исключения.

Но при этом, вне организма инфекция моментально погибает. Солнечный свет и внешние факторы негативно влияют на нее. Хранится бактерия трепонема может только в увлажненных условиях либо же при замораживании.

Передается заболевание исключительно при непосредственном контакте с человеком, который является носителем этой инфекции, а именно при половом акте, либо же при переливании крови. Поэтому и риск ВИЧ заражения и гепатита тоже растет.

Ранее, когда медицина была не настолько развитая, сифилис диагностировался, даже как врожденное заболевание.

Ребенок мог заразиться еще в утробе матери, но на сегодняшний день такие случаи большая редкость, так как беременным женщинам еще на начальных сроках врачи рекомендуют сдать анализ крови на сифилис.

Из истории заболевания

Первые случаи заболевания на сифилис были зафиксированы в Европе еще в конце XV столетия. Понятное дело, что медицина в то время не знала как справляться с этим недугом, тем более что он очень быстро распространился.

Всего за 5 лет по всей Европе, Африке, России и в многих других странах люди страдали от этого недуга. Такая сильная волна вируса забрала жизни миллионов людей.

Симптомы проявления сифилиса

Симптомы сифилиса зависят от стадии заболевания. В целом их выделяют две: первичная стадия и вторичная.

В первичной стадии появляется язва с очень твердым основанием, но при этом никаких болевых ощущений не возникает.

Уже через пару недель увеличиваются лимфатические узлы, которые находятся ближе к возникшей язве. И в течение шести недель язва сама по себе заживает.

Важно! Не забывайте, что при любом высыпание на коже, а тем более, если оно на половых органах, необходимо обязательно проконсультироваться с врачом дерматологом и сделать анализ на сифилис рпр.

Вторичный же сифилис проявляет себя через десять недель, после того как появилась язва. На этом этапе возможно возникновение неприятной сыпи хаотично по всему телу, даже на подошвах и ладонях.

Помимо этого могут наблюдаться сильные головные боли и высокая температура. Состояние такое же как при обычной простуде и наблюдается увеличение лимфатических узлов. Вторичная стадия может продолжаться на протяжении нескольких лет.

Поэтому и необходимо срочное лечение, чтобы заболевание не усугубилось и инфекция не смогла поразить все органы и ткани организма человека. После чего возможно развитие ряда заболеваний, в том числе и гепатита.

Особо осторожны должны быть люди ВИЧ – положительные, учитывая то, что сифилитическая язва может стать причиной передачи ВИЧ инфекции.

Лабораторная диагностика сифилиса

Лабораторное исследование заключается в том, что в пробирке размножают участки ДНК трепонемы в условиях повторяющихся температурных циклов. На каждом этапе количество искусственно воспроизведенных копий возбудителя болезни удваивается. Специалисты называют это амплификацией фрагментов ДНК. Происходит разделение молекул по их весу, что и позволяет выявить трепонему.

ПЦР

Методика ПЦР-исследования позволит отыскать одну молекулу сифилиса даже в том случае, если она одна на тысячи других молекул. Генетический материал для ПЦР-тестирования могут забирать из непосредственно сифилитических язв, ликвора, плацентарной ткани, крови из пальца и даже семенной жидкости. Наиболее часто врачи используют именно тканевую жидкость из язв.

Эффективность ПЦР-исследования достигает 98,6%. При правильно подготовленном исследовании ложноположительные результаты при этом методе практически исключены. Также именно к данной методике врачи прибегают, если предполагают небольшое содержание трепонем в исследуемом материале. Именно этот фактор становится определяющим, если необходимо провести анализ при подозрении на врожденный сифилис.

Статья

 Заболевание распространяется не только половым путем, но и при использовании зубной щетки, кухонной посуды, полотенца и других бытовых предметов вместе с больным человеком. Иногда болезнь может протекать бессимптомно (пассивный вид), при этом остается риск заражения окружающих. Сдать анализ на сифилис можно в районной поликлинике и частном врачебном кабинете анонимно. Как называется анализ и где его можно сдать.

Клинический анализ крови (РВ/RW)

Самый распространенный способ диагностирования сифилиса – проведение общего анализа крови. Данная иммунологическая процедура называется реакцией Вассермана. Тестирование относится к классу РСК (реакция связывания комплемента) и впервые было проведено в 1906 году.

Оно базируется на способности венозной крови сворачиваться и образовывать комплекс при взаимодействии с антигенами. Современные методы РСК в выявлении сифилитической инфекции существенно отличаются от классической RW. По сути, эти процедуры имеют только одинаковое название.

Постановка диагноза осуществляется с учетом того, присутствуют ли в исследуемом образце антитела, свидетельствующие о наличии заболевания. Несмотря на то что тестирование является максимально информативным и достоверным, нельзя исключать вероятности проявления ложноположительной реакции.

Ложноположительный ответ связан с тем, что в человеческом организме изначально присутствует кардиолипин, однако обычно иммунная система не создает антитела против родного антигена. Но медицинская практика показывает, что исключения случаются. Чаще всего это происходит, если человек недавно перенес вирусное заболевание тяжелой формы или столкнулся со следующими заболеваниями:

• воспаление легких;
• дисфункция почек;
• гематологические заболевания.

И также ложноположительная реакция нередко проявляется во время беременности, что сопровождается сильным ослаблением иммунной системы. Если специалист подозревает, что тестирование показало ложноположительный результат, пациенту назначаются дополнительные расширенные анализы.

Показания к проведению

Условно все анализы на сифилис называются ОРС. Аббревиатура расшифровывается как отборная реакция на сифилис. Под этим термином подразумевается диагностическое лабораторное исследование, в ходе которого можно обнаружить антитела к фосфолипидам, формирующиеся из-за поражения клеток и тканей, вызванного бледной трепонемой.

Проверка на сифилис чаще всего проводится людям с подозрением на наличие заболевания, а также пациентам, которым назначено полноценное медицинское обследование. При этом стоит учитывать, что исследование предполагает проведение дополнительного анализа на ВИЧ и гепатит.

И также тестирование на сифилис назначается в следующих случаях:

• постановка женщины на учет при беременности;
• если пациент выступает как донор;
• при пребывании в местах лишения свободы;
• если предыдущие анализы показали присутствие в крови пациента наркотических веществ;
• длительное увеличение размера региональных лимфатических узлов;
• продолжительная лихорадка неясной этиологии;
• предыдущее тестирование показало присутствие бледной трепонемы;
• если у человека был половой контакт с зараженным сифилисом;
• возникновение сомнительной симптоматики, указывающей на развитие заболевания (первый признак сифилиса – появление высыпаний в области половых органов).

И также сдать биоматериал на исследование необходимо, если человек хочет устроиться на работу в некоторые учреждения:

• воинская часть;
• больницы, поликлиники, лаборатории;
• кафе, рестораны, столовые и другие места общественного питания;
• школы, детские садики.

Регулярное тестирование нужно проводить пациентам, у которых уже диагностировано данное заболевание. В этом случае анализ назначается для оценки эффективности выбранной схемы лечения.

Где можно сдать анализ на сифилис?

Заказать исследование биоматериала на сифилис можно:

• в любой поликлинике;

• частной клинике;

• лаборатории.

Преимущество бюджетных учреждений состоит в том, что там эта услуга бесплатна. Существенный минус заключается во времени ожидания анализа, слабом материально-техническом обеспечении некоторых государственных поликлиник и в том, что если сифилис выявят, то скрыть этот факт будет затруднительно.

Частные клиники и лаборатории согласны работать с пациентами на условиях конфиденциальности. Это подойдет тем, кто не хотел бы, чтобы о его заболевании стало известно. Но следует помнить, что бланк с результатом, где не фигурирует имя пациента, не подлежит приему ни в одной организации.

Разумеется, за анализ в частном учреждении придется заплатить, но и результат можно будет узнать через 2-3 дня. Более того, многие клиники без проблем предлагают экспресс-тестирование и сообщают о результатах анализов уже через пару часов.

Материал для исследования

Наиболее часто для анализа на сифилис используется кровь пациента. Иногда в крови содержатся антитела, вызывающие ложноположительную реакцию.

В таких случаях возможный диагноз может быть подтвержден исследованиями другого биологического материала:

• Распространяются по организму и затрагивают спинной мозг. Специальный анализ крови на сифилис Реакция по Вассерману, может подтвердить наличие болезни
• Жидкость, взятая из язвы (твердого шанкра). Исследование вещества имеет высокую достоверность и может быть назначено по клиническим показаниям
• Лимфоузлы в паховой области при развитии болезни воспаляются и увеличиваются. Обследование воспаленных участков может помочь диагностике
• Венозная или артериальная кровь. Кровь на сифилис должна сдаваться натощак из вены или пальца в зависимости от типа анализа

Чтобы узнать, где сдать все анализы на сифилис, нужно обратиться к врачу при первых признаках заболевания. Лабораторные исследования проводятся во многих частных и государственных лабораториях. Сдачу крови на сифилис можно провести в медицинском учреждении или вызвать лаборанта на дом. Должный вид теста определяет врач. Лаборатория проведет тест на сифилис и исследование покажет наличие и отсутствие болезни.

Прямые тесты

Какие анализы сдают на сифилис, этот вопрос часто можно услышать от пациентов. Сегодня существует несколько видов тестов, которые могут показать наличие инфекции в крови. Анализ крови на сифилис, известный как темнопольная микроскопия, является современным методом диагностики с достаточно высокой достоверностью результатов. Исследуемый материал изучается при большом увеличении и специальном подсвечивании образца.

Исследование выявляет наличие бледных трепонем (возбудителя сифилиса) на более темном фоне.

При простом исследовании образца под микроскопом достоверность метода составляет 97% и позволяет обнаружить болезнь у 8 из 10 зараженных. Если анализ крови при сифилисе показывает отрицательный результат, но у пациента имеются ярко выраженные клинические симптомы сифилиса, назначается дополнительное исследование.

Самые точные исследования называются ПЦР анализы на сифилис или полимеразная цепная реакция. Для проведения исследования требуется современное медицинское оборудование и квалифицированные специалисты. Где же можно сдать анализы на сифилис по данному методу? К сожалению, анализ ПЦР могут предложить только частные лаборатории. Ввиду сложности проведения и высокой стоимости анализа, немногие лаборатории предлагают исследование с помощью полимеразной цепной реакции.

В предоставленном образце крови определяется наличие или отсутствие молекул ДНК возбудителя болезни. Достоверность ПЦР на сифилис приближена к 100% и является основой для подтверждения или опровержения диагноза лечащим врачом. Современное молекулярное исследование позволяет обнаружить в исследуемом образце наличие всего двух молекул заболевания. Получить самый точный результат ПЦРа на сифилис можно только при соблюдении всех правил и норм лабораторных исследований. Тест на сифилис может быть готов уже через 5 часов после забора крови. Стоит отметить, что общий анализ крови не выявляет данную инфекцию.

Нетрепонемные исследования

Серологическая диагностика сифилиса предусматривает анализ крови на наличие антител. Существует несколько видов исследований, кровь на которые можно сдать в лаборатории. При проведении медицинских осмотров и обследовании большого количества пациентов назначаются, как правило, один из нетрепонемных (неспецифических) анализов. Если в крови обнаруживаются антитела к сифилису, результат анализа считается положительным. Какие анализы на сифилис следует сдавать пациенту, зависит от клинической картины. На сифилис анализ должен быть назначен квалифицированным врачом.

Реакция Вассермана широко распространенный тест, который может показать заражение на 6 неделе болезни. Другое название исследования «РВ-тест» или «RW». Для проведения анализа необходимо сдать кровь из вены или пальца натощак. Обычно лаборатории проводят забор крови сутра и рекомендуют пациентам воздерживаться ночь (8–12 часов) от еды и напитков, кроме минеральной воды. Реакция Вассермана определяет заражение по количеству титров антител. Отрицательный результат помечается математическим знаком «минус» (-).

Слабоположительный результат маркируется одним или двумя плюсами (+, ++), положительный тремя плюсами (+++) и четыре плюса (++++) означают резко положительную реакцию.

Также к нетрепонемным методам исследований относится RPR тест. Это исследование считается более современным и точным по отношению к RW анализу. RPR проводится на венозной крови пациента и выявляет наличие антител к фосфолипидам цитоплазматической мембраны. РПР тест можно сделать в частной клинике.

Похожим способом является реакция микропреципитаци, которую используют в современных лабораториях.

Микрореакция преципитации (МРП или МР-тест) проводится спустя 4–5 недель после предполагаемого заражения. Для исследования используется капиллярная кровь. Микрореакция на сифилис не относится к точным методам диагностики. Положительная серологическая реакция на сифилис по МРА должна быть подтверждена одним из специфических тестов. Отрицательный результат теста означает начальную стадию или отсутствие заболевания.

Трепонемные исследования

Почему нужно сдавать анализ на сифилис повторно? Часто трепонемные исследования используются в качестве контрольного анализа, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз после нетрепонемного теста. Сомнительный результат первого теста означает, что придется сдать анализы на сифилис повторно.

Реакция пассивной агглютинации (РПГА, РНГА). Анализ на сифилис РПГА является быстрым методом исследования, результат можно узнать уже через час. Чтобы проверить кровь на наличие сифилиса по РПГА-тесту, анализ проводится спустя месяц после контакта с больным. Гемагглютинация может давать ложноположительный результат при мононуклеозе и ряде других заболеваний.

Для диагностики болезни на ранних стадиях применяется Реакция иммунофлюоресценции (РИФ-тест). Анализ крови из пальца или вены с помощью РИФ может выявить заболевание спустя 1,5–2 месяца после контакта с больным.

Во время проведения РИФ-теста антитела четко выделяются свечением в ультрафиолетовом свете.

При беременности или наличии системных заболеваний соединительной ткани (ревматоидный артрит и пр.) РИФ-тест может оказаться ложноположительным. Поэтому очень важно предоставить врачу достоверную информацию о себе и медицинскую карту. Положительная реакция обозначается знаками «+” от одного до четырех.

Реакция иммобилизации бледной трепонемы, также известная как РИБТ-тест пользуется высокой популярностью. Серодиагностика по методу РИБТ достоверна в 99% случаев. Однако анализы крови могут быть назначены только спустя 12 недель после контакта с носителем болезни.

РИБТ-исследование проводится спустя 3,5–4 месяца после возможного заражения. Заболевание определяется с вероятностью 99%.

Иммуноблотинг способен дать 100% результат и реагирует даже на очень маленькое содержание антител в крови пациента.

Иммуноферментный анализ или ИФА способен выявить болезнь уже спустя 3 недели после возможного заражения. Достоверность положительного результата составляет 98%. Этот анализ называют одним из самых точных. Как же очистить кровь от сифилиса? Как лечат сифилис какие нужны повторные обследования скажет квалифицированный врач. Не занимайтесь самолечением!

Трактовка результата

Как трактовать результаты анализа на RW?

1. «-» отрицательная реакция.
2. «+», «++» слабоположительная реакция.
3. «+++» положительная реакция.
4. «++++» резко положительная реакция.

При положительной реакции Вассермана человек должен незамедлительно обратиться к врачу – венерологу для назначения дальнейшего исследования, и в случае подтверждения заболевания, назначения адекватного лечения и наблюдения.

Бланк направления на анализ крови реакция Вассермана

Ведь при своевременно начатом лечении появляется больше шансов на полное избавление от болезни, и предотвращает его переход в хроническую форму. Тем более такое заболевание как сифилис не проходит без следа, оно может вызывать серьезные последствия и угрожает жизни человека.

Преимущества и недостатки

ИФА очень часто назначается при подозрении на сифилис или другие инфекционные заболевания. Это обусловлено тем, что анализ позволяет выявить точный тип и стадию заболевания, причем его достоверность сохраняется на высоком уровне – вероятность ошибки по итогам многократного исследования составляет всего 1%, первичный ИФА имеет точность около 90%.

Использование качественных реактивов и современного оборудования позволяет максимизировать точность показателей.

В целом преимуществами метода являются:

1. Высокая точность результата. Вероятность получения ложных данных очень мала.
2. Минимизация человеческого фактора влияния. Современное оборудование для проведения ИФА исключает влияние человека на итоги исследования за счет автоматизации процесса.
3. Выявление конкретных антител. Спутать антигены одного вида с другими невозможно, поэтому анализ показывает точный результат по конкретному диагнозу.
4. Фиксация малейших отклонений от нормы. Даже самая незначительная концентрация патологических агентов не останется без внимания.

Не стоит забывать и о слабых сторонах этого метода. ИФА обладает следующими недостатками:

1. Высокая цена. Высокая стоимость обусловлена многими факторами, в частности, необходимостью хорошего оборудования, качественных реагентов и специалистов с достаточным уровнем подготовки.
2. Необходимость постановки предварительного диагноза. Нужно знать какие именно антигены искать, так как без дополнительных данных поставить точный диагноз будет невозможно.
3. Вероятность ложноположительного результата. Некоторые состояния организма и прочие факторы могут исказить итоговые данные.

Ложные результаты

Вне зависимости, сколько делается проверка и какой именно формат лабораторной диагностики был выбран, всегда сохраняется риск погрешности. В медицинской практике на него приходится около 5% от общего числа диагностируемых случаев.

Обычно у пострадавших с неправильно выставленным вердиктом фиксируют ложноположительный итог. Повлиять на неправильную результативность способны различные диффузные болезни соединительной ткани. Даже классический артрит ревматоидного типа может повлиять на достоверность собственной информации. То же самое касается системной красной волчанки.

Но чаще всего препятствием становится более тривиальная причина вроде сахарного диабета или недавно проведенная вакцинация пациента. Идентичная картина прослеживается, если пациент имеет ряд инфекционных болезней тяжелого течения вроде мононуклеоза или туберкулеза. Вирусный гепатит или болезни сердечной мышцы тоже способны сбить качестве предоставляемых сведений. Особенно это касается эндокардита.

Люди, которые страдают алкоголизмом на самых запущенных стадиях, либо принимают наркотики вне зависимости от их конкретного типа, тоже подвержены риску получить ненастоящий итог.

Намного реже встречаются ситуации, где фигурируют ложноотрицательные значения. Причиной для подобной путаницы будет только один аспект – слишком ранние сроки диагностики. Изредка такая же клиническая картина прослеживается у тех, кто находится на поздней стадии сифилиса. Это затрагивает инфицирование на фазе, когда выработка антител практически полностью застопорилась.

Схематическая расшифровка

Приблизительно в 90% всех фиксируемых случаев первичный сифилис успешно диагностируется за счет стандартной реакции Вассермана. Но только при условии ее проведения хотя бы с шестой недели после предполагаемого незащищенного сексуального контакта.

Среднестатистическая реакция предусматривает отсутствие ярко выраженных показателей в первые 15-17 дней. Но вот уже на пятой недели около четверти испытуемых могут получить достоверный итог. Однако, эксперты настаивают на том, что для окончательного личного успокоения необходимо дождаться окончания восьмой недели, а только потом отправляться сдавать RW.

Когда речь идет о вторичной фазе, то тут все происходит вне зависимости от временных интервалов. Процедура без существенных препятствий выявит возбудителей, если они все же имеются в организме.

Но тут одним RW доктор редко когда обходится. Обычно необходимо включить для обстоятельности еще несколько серологических реакций, что позволит точнее определить приблизительный срок занесения инфекции.

Особенное внимание стоит уделить сифилитической инфекции на четвертой неделе заболевания, когда проявляется первичная сифилома. В этот момент реакция Вассермана переходит из отрицательной в положительную, закрепляясь на все оставшееся время, пока проходит стадия вторичного свежего и вторичного рецидивного течения

Лучшие материалы месяца

• Почему нельзя самостоятельно садиться на диету
• Как сохранить свежесть овощей и фруктов: простые уловки
• Чем перебить тягу к сладкому: 7 неожиданных продуктов
• Ученые заявили, что молодость можно продлить

Когда речь заходит о вторичном периоде без лечения, то RW иногда все же способна возвращаться к отрицательному показателю. Но как только наступает клинический рецидив сифилиса, ситуация возвращается к более привычной.

На фоне этого эксперты не устают повторять, что скрытый период заболевания крайне коварен. Отрицательная реакция Вассермана еще ни о чем не говорит, включая окончательную излеченность. Единственным положительным аспектом при условии ранее назначенного и исправно исполняемого лечения тут выступает благоприятный прогноз на дальнейшую реабилитацию.

Что касается активного поражения при третичной ступени, то тут явственный результат прослеживается в большей части произведенных анализов среди больных. Но после угасания активных проявлений на третичной степени, реакция становится отрицательной.

Подобные колебания иногда ставят в тупик даже опытных специалистов, поэтому пытаться самостоятельно расшифровать документ из лаборатории – сложная задача. Лучше возложить столь обременительные обязанности на плечи лечащего доктора

Особенно важно довериться врачу при серорезистентной форме. Она свидетельствует о том, что энергичная противосифилитическая терапия не принесла своих плодов

Циклично проверять динамику в такой ситуации – бессмысленное дело.

После завершения процедуры забора крови эксперты советуют придерживаться весь день рационального питания и употреблять больше жидкости. Алкоголь тоже нужно исключить. Дополнительно придется отказаться от физических нагрузок, побаловав себя вместо этого кусочком шоколада и теплым чаем.

Информация об исследовании

Реакция преципитации (RPR) – современный тест, пришедший на смену менее точной реакции Вассермана (Сифилис RW)

Сифилис – это инфекционное заболевание, которое вызывает спиралевидная бактерия Treponema pallidum (бледная трепонема).

Rapid Plasma Reagins Test (сифилис RPR) – лабораторное исследование, выявляющее антифосфолипидные антитела IgM и IgG (реагины), которые иммунная система продуцирует при появлении в крови липидных антигенов (АГ). АГ выделяются в результате гибели T. pallidum и разрушения клеток, к которому, однако, могут приводить и некоторые другие заболевания несифилитической природы.

Бактерия сохраняется в сперме, влагалищном секрете, слизи, гное и т. п. Вне организма погибает при высыхании биологических жидкостей, 15-минутном нагревании до 55 ^оС, обработке 50–56%-ным раствором этилового спирта, но выживает при низких температурах и заморозке.

Возможные пути передачи инфекции:

• половой – самый распространенный путь передачи, при котором бактерия проникает в организм через микроповреждения на половых органах;

• трансплацентарный – инфицирование плода через плаценту; может приводить к мертворождению или врожденной патологии у ребенка;

• гемотрансфузионный – при переливании инфицированной донорской крови или ее компонентов здоровому реципиенту;

• контактно-бытовой – редкий путь передачи; описаны отдельные случаи заражения детей родителями, у которых наблюдались высыпания на коже или слизистых оболочках.

Без лечения заболевание приводит к мультисистемному поражению организма и может в 3 и более раз повышать риск заражения ВИЧ-инфекцией.

Инкубационный период длится от 2 недель до 2 месяцев и оканчивается первичным аффектом – появлением в месте внедрения бактерии безболезненной эрозии или язвы округлой формы (сифиломы, твердого шанкра). Следующий этап – первичный сифилис – может выражаться воспалением лимфатических узлов и половых органов.

Вторичный сифилис наступает при распространении трепонем по всему организму с кровотоком. Характерное проявление – язвы на половых органах, в ротовой полости, вокруг ануса и в прямой кишке, алопеция, нарушение пигментации отдельных участков кожи.

Третичный сифилис может развиться сразу после вторичного, но при бессимптомном течении заболевания часто проявляется спустя длительное время после заражения. Поражает сердце, мозг, кровеносные сосуды, нервную и костно-мышечную системы. В России растет частота выявления третичного нейросифилиса: с 2000 по 2010 год заболеваемость увеличилась в 7,2 раза.

Rapid Plasma Reagins Test (сифилис RPR) – лабораторное исследование, выявляющее антифосфолипидные антитела IgM и IgG (реагины), которые иммунная система продуцирует при появлении в крови липидных антигенов (АГ). АГ выделяются в результате гибели T. pallidum и разрушения клеток, к которому, однако, могут приводить и некоторые другие заболевания несифилитической природы.

Показания к назначению исследования

1. Скрининговое обследование (в соответствии с приказом Минздрава РФ). 
2. Диагностика скрытого сифилиса при отсутствии выраженной клинической картины.
3. Обследование доноров крови (в комплексе с трепонемным тестом), беременных; перед трудоустройством в детские учреждения и на предприятия пищевой промышленности.
4. Госпитализация в стационар. 5. Снятие с учета после лечения.

Подготовка к исследованию

RPR-тест не требует специальной подготовки. Пациентам рекомендовано сдавать кровь натощак (минимум через 4 часа после еды).

С этим исследованием сдают

• 3.9.1. Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой и СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений) (венозная кровь, срочный)
• 20.21. Гепатит В, Hbs Ag (кач.). Первичный анализ
• 20.22. Гепатит С, anti-HCV сумм. (кач.). Первичный анализ

Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика

При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Антитела к бледной трепонеме IgM

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела к бледной трепонеме IgG

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Неспецифические антитела

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Ложноположительные анализы на сифилис

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе,  онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

Обнаружение бледной трепонемы методом темнопольной микроскопии (ТПМ).

В России в качестве рутинного метода прямой визуализации T. pallidum традиционно используется метод темнопольной микроскопии (ТПМ, dark field microscopy, DFM).

1. Конденсор темного поля

Исследование на бледную трепонему в темном поле зрения проводится с помощью стандартного микроскопа, снабженного конденсором темного поля.
Конденсор представляет собой двояковыпуклую линзу, прикрепляемую снизу предметного столика с таким расчетом, чтобы линза конденсора располагалась под отверстием предметного столика. Конден­сор служит для собирания (конденсации) пучка световых лучей, что обеспечивает наибольшее освещение исследуемого предмета.
Неокрашенные живые бледные трепонемы не видны в световой микроскоп при обычном освещении препарата. Необходимые условия создаются путем замены обычного конденсора микроскопа особым конденсором, в котором центральная часть затемнена и проникновение лучей света происходит через узкую щель. 
Вследствие получающегося при этом бокового освещения достигается отраженное свечение всех твердых частиц на темном поле (это называется “эффектом Тиндаля”), в том числе бледной трепонемы. Для получения темного поля необходим сильный источник света.

2. Бледная трепонема, характерные особенности при темнопольной микроскопии

Исследование в темном поле микроскопа позволяет изучать бледную трепонему (БТ) в живом виде, а также достоверно отличать её от других трепонем как по морфологическим признакам, так и по характерным особенностям движения.
Чтобы отличать бледную трепонему от морфологически сходных типов сапрофитных трепонем, бледные трепонемы при исследовании должны быть живыми. Темнопольное исследование взятого материала должно быть проведено немедленно, сразу после получения образца, поэтому оборудование должно быть подготовлено заранее. 
В затемненном поле зрения бледная трепонема выглядит, как движущаяся тонкая спираль или тонкий нежный пунктир с серебристым оттенком, слабо преломляющие свет. Помимо этих бактерий, в препарате все поле зрения усеяно массой мельчайших светящихся точек, находящихся в хаотичном броуновском движении. 

3. Применение темнопольной микроскопии для диагностики сифилиса

Микроскопию в темном поле можно применять для диагностики первичных и вторичных поражений кожи при сифилисе в результате заражения половым путем. В редких случаях этот метод можно использовать при третичном сифилисе (в последнем случае — если материал взят из глубины инфильтрата или со дна язвы). 
Также с помощью этого метода исследуют поражения при раннем врожденном сифилисе, когда заражение плода бледной трепонемой произошло в утробе матери. Чтобы подтвердить диагноз “врожденный сифилис”, для приготовления препарата для микроскопии можно использовать ткань пуповины, органы плода, выжатый сок плаценты, амниотическую (плодную) жидкость, отделяемое слизистой оболочки носа, содержимое пузырей (при ладонно-подошвенной сифилитической пузырчатке), тканевой жидкости (серума) с раздраженных папул. 
Метод темнопольной микроскопии, используемый для диагностики сифилиса, отличается простотой, дешевизной, быстротой и достаточно высокой чувствительностью. Однако у него есть известные недостатки – невозможность диагностики скрытых и поздних форм сифилиса и непригодность для контроля излеченности. Даже многократный отрицательный результат микроскопического исследования на бледную трепонему не может исключить сифилис. 
Кроме того, для проведения исследования методом ТПМ микроорганизмы T. pallidum должны быть подвижными. В условиях применения пациентами различных антибактериальных препаратов, в том числе для лечения других заболеваний, диагностическая чувствительность ТПМ снижается. В подобных случаях необходимо исследование методом прямой иммунофлюоресценции (ПИФ) или проведение серологического обследования на сифилис. 
Для повышения информативности лабораторной диагностики разрабатываются более чувствительные и специфичные прямые тесты на основе молекулярно-биологических технологий, например различные модификации метода ПЦР.

Метод прямой иммунофлюоресценции (ПИФ)

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)

• PCR в режиме реального времени (PCR-RT). Учет полученных результатов происходит автоматически в режиме реального времени по уровню свечения флюорохромных меток; 
• методика PCR-анализа с помощью обратной транскриптазы (PCR-ОТ);
• мультиплексная PCR (PCR-М, М-ПЦР), которая позволяет в биоло­гической пробе одновременно определять наличие возбудителей нескольких заболеваний.

Основными достоинствами метода ПЦР и его модификаций является универсальность (возможность обнаружить любые нуклеиновые кислоты), весьма высокая чувствительность (80 – 94,7 %) и высокая специфичность (до 100 %). Результат получается быстро, для анализа необходима проба малого объема (несколько микролитров). Современные методы ПЦР позволяют одновременно исследовать нескольких возбудителей заболеваний, а также получать документальный ответ в виде фотографий и вносить результаты диагностики на компьютерные информационные носители. К недостаткам метода ПЦР-анализа следует отнести высочайшие требования к оснащению лаборатории, качеству тест–наборов и регламенту исследования.
Метод ПЦР является дополнительным и может быть рекомендован, главным образом, для исследования отделяемого эрозивных и язвенных высыпаний при подозрении на первичный сифилис, особенно„ при их локализации на слизистой оболочке рта; „ при применении пациентами местных и системных антибактериальных средств накануне обращения к врачу; „ при отрицательных результатах серологических тестов в начале первичного периода, когда ошибка метода ТПМ особенно значима.
Развитие высокочувствительного метода ПЦР и разработка его модификаций, оценивается как весьма перспективное. Особую важность этот метод приобретает при диагностике первичного серонегативного сифилиса (при котором серологические исследования дают отрицательный результат), раннего скрытого, врожденного сифилиса и нейросифилиса. 
Препятствием к широкому внедрению метода ПЦР для диагностики сифилиса является отсутствие в массовой доступности тест-систем, разрешенных к медицинскому применению. В США применение ПЦР рекомендовано лабораториям, располагающим соответствующими тест-системами (в том числе созданными в самих лабораториях, in house). В России и странах Восточной Европы широкое использование метода лимитируется небольшим количеством наборов реагентов, прошедших валидацию и разрешенных к медицинскому применению на территории соответствующих государст

Особенности возбудителя

Бледная трепонема – извитой формы микроорганизм, который при рассмотрении его под микроскопом, напоминает дождевого червя. Завитки позволяют ей вращаться вокруг своей оси и совершать ряд поступательных движений. «Бледной» спирохету сделала плохая окраска анилиновыми красителями.

Большинство микроорганизмов есть возможность культивировать на искусственно созданных питательных средах, как вирус гриппа на куриных эмбрионах, или возбудитель шанкроида на шоколадном агаре. Бледная спирохета не является из числа таковых.

Ее естественная среда обитания – человек. Потому, так как диагностировать сифилис путем выращивания культуры не удается, был изобретен ряд других методик, позволяющих подтвердить ее наличие в организме человека.

Структура бледной трепонемы.

Возбудитель сифилиса является малоустойчивым организмом, в связи, с чем вне среды организма человека погибает довольно быстро. Путь заражения в подавляющем большинстве половой, однако, может быть трансплацентарным (от матери к ребенку) и контактным, чаще встречающимся среди медицинского персонала. Входными воротами являются слизистые оболочки, где на месте внедрения спирохета образует язву – твердый шанкр.

Бледная трепонема имеет способность к генерализации в организме человека, благодаря чему мы знакомы с клиникой сифилиса такой, какая она есть. Образование сифилитических гумм характеризует заболевание как специфический вид воспаления и способно тяжело поражать различные системы органов, включая ЦНС, кардиоваскулярную систему, органы чувств и так далее.

Лабораторная диагностика сифилиса, а что еще важнее – ее соответствующее применение и правильная интерпретация важны как для раннего обнаружения болезни, так и для подбора оптимальной терапии.

Кого будем проверять?

Диагностировать можно как пациентов с явными и не очень симптомами заболевания, так и совершенно бессимптомных индивидуумов.

Как определить, кого направить на диагностику? Очень просто – первая группа (симптоматическая) в любом случае требует проведения ряда анализов, вторая – касается лишь людей, относящихся к группе повышенного риска.

Качественная лабораторная диагностика – важный этап в диагностике сифилиса.

Высокая степень риска носительства бледной трепонемы присуща следующим категориям людей:

• пациенты, чей половой партнер был диагностирован ранее с сифилисом;
• лица нетрадиционной ориентации;
• пациенты с положительным ВИЧ статусом;
• анамнез жизни, отягощенный тюремным заключением или работой, связанной с предоставлением секс-услуг.

ВИЧ-положительные пациенты относятся к группе риска по заболеваемости сифилисом.

Внимание! В обязательном порядке скринингу на сифилис подлежат все беременные женщины при постановке их на учет, независимо от степени риска. Такой подход направлен на снижение частоты встречаемости врожденных форм сифилиса за счет ранней его диагностики.

Диагностические тесты

Серологическая диагностика сифилиса – самый распространенный метод его обнаружения, обеспечивает нас предположительным диагнозом. Выделяют нетрепонемные и трепонемные тесты.

Изолированное использование только одного вида анализов не позволяет подтвердить диагноз из-за достаточно высокой частоты ложноположительных результатов.

На фото представлена микрофотография бледной спирохеты в темном поле.

Кроме всего прочего, серодиагностика сифилиса базируется на гуморальном иммунном ответе организма на инфекцию. Так, пациенты с заведомо известной иммунной супрессией, имеют немалый шанс получения ложноотрицательных результатов анализов.

• Нетрепонемные тесты. Их действие основано на реакции сыворотки инфицированного человека на сифилитические антигены. Традиционно они используются только для первичного скрининга из-за своей неточности и неспецифичности. Однако благодаря им есть возможность выделить группу людей повышенного риска для наличия сифилитической инфекции.

Положительными сторонами использования являются их низкая цена, легкость в исполнении и возможность количественной оценки, применяемой для определения ответной реакции организма на проводимое лечение. Нетрепонемные тесты включают в себя такие методики, как RPR (rapid plasma reagin test) – анализ быстрых реагинов, VDRL (venereal disease research laboratory) – реакция микропреципитации, а также TRUST-тест.

Положительный результат исчисляется в титрах антител к бледной трепонеме, циркулирующих в организме человека (как IgM, так и IgG). Даже при отсутствии специфической терапии титры имеют особенность ослабевать, однако применение антисифилитического лечения приводит к значительному снижению титров антител, и потому может быть использовано как качественный индикатор эффективности терапии. О применении данных тестов рассказано также в видео в этой статье.

• Трепонемные тесты. Данная группа анализов является более финансово затратной, а также значительно сложней в исполнении, по сравнению с нетрепонемными тестами. Традиционно они используются как подтверждающий метод при положительном результате скринингового метода.
  Специфические трепонемные тесты включают в себя реакции иммунной флюоресценции, РПГА (реакция прямой гемагглютинации), ИФА (иммуноферментный анализ), а также реакция иммобилизации трепонем.

Данная группа анализов направлена на обнаружение специфических антител, направленных на определенные антигены бледной спирохеты, за счет чего считаются более достоверными. В отличие от нетрепонемных тестов, результаты анализов данной группы исключительно качественные, а не количественные.

Важно! Большинство таких тестов не различают результат между впервые диагностированным, и ранее перенесенным заболеванием, так как направлены на обнаружение антител, которые сохраняются в организме даже после полноценного лечения.

• Прямые методы диагностики. Не смотря на то, что микроорганизм невозможно культивировать искусственно, это не мешает его визуализировать. Для этого используется микроскопия в темном поле и прямая реакция иммунофлюоресценции (DFA, direct fluorescent antibody testing). Однако ни один из этих тестов не распространен повсеместно, так как требует специального оборудования для проведения диагностики.

Внимание! Микроскопия в темном поле – это не только достоверный анализ, но и экспресс метод диагностики сифилиса, которым можно исследовать любые среды, выделенные из сифилитических повреждений.

• Также все более широко начинает использоваться ПЦР (полимеразная цепная реакция), смысл которой заключается в обнаружении ДНК спирохеты. Специфичность такого теста достигает до 98%, однако достаточно широкое внедрение данного метода ограничено финансовыми вопросами, так как ПЦР – достаточно дорогостоящий анализ.

Подход в диагностике реального пациента

Одно дело разобрать, какие тесты используются в обнаружении сифилиса, и совсем другие – понять, что делать с пациентом с вероятным диагнозом «сифилис», а именно – что говорит инструкция, алгоритм назначения диагностических мероприятий.

Первым этапом лабораторной диагностики является серология, а именно нетрепонемные тесты. Несмотря на недостаточную специфичность, с их помощью можно определить – требуется для данного конкретного человека дальнейшее обследование.

Чаще с этой целью используют тест быстрых реагинов (RPR). Положительный результат переводит к следующему этапу – более специфичному трепонемному тесту, например ИФА (наиболее используемому) или РИФ.

Объяснение пациенту важности диагностики – необходимый этап в его лечении.

Важно! Отрицательный результат первичного исследования у бессимптомных пациентов не требует последующих анализов.

Интерпретация серологических тестов

Правильное заключение результат зависит на клинических проявлениях заболевания у пациента, его иммунного статуса, наличия коморбидных патологий, истории сифилиса ранее в течение жизни.

СКВ повышает шанс на ложноположительный результат анализа на сифилис.

Итак:

1. Положительный нетрепонемный и положительный трепонемный. Такая комбинация у человека, ранее не переносившего сифилис является достоверным первичным диагнозом «сифилис», который требует лечения и детальной оценки с целью определения стадийности заболевания. В свою очередь, пациент, анамнез жизни которого отягощен данной патологией в прошлом, требует более тщательного обследования. Врач в таком случае должен полагаться также на данные физикального обследования и титры нетрепонемного теста.
2. Позитивный нетрепонемный и негативный трепонемный. Подобного рода комбинация в случае диагностики сифилиса чаще характеризует ложноположительный результат тестирования пациента. Получению такого ответа при исследовании может способствовать имеющийся в организме аутоиммунный процесс (например, СКВ), острый период болезни (эндокардит), хронические заболевания печени, иммунизация, проведенная незадолго до диагностики сифилиса.
3. Отрицательный нетрепонемный и положительный трепонемный. Данная картина наиболее характерна для пациента, эффективно вылечившего ранее существующий у него сифилис, при котором остались специфический для бледной трепонемы антитела. Для такого человека обследования на сифилис на этом заканчиваются, и тест считается отрицательным на момент проведения тестирования. Если же анамнез по сифилису такого пациента не отягощен, дальнейшее обследование требует детализации, направленного на поиск признаков сифилиса, оценки факторов риска для конкретного больного.
4. Отрицательная серология. Среди людей с прогрессивными формами угнетения иммунного ответа (чаще это пациенты уже с развитым СПИДом) встречаются случаи ложноотрицательных анализов за счет недостаточного ответа иммунной системы на поступивший антиген.

Интерпретация результатов анализов должна быть индивидуальна у каждого пациента.

Важно! Ложноотрицательный результат у пациента с явными симптомами первичного сифилиса возможен в случае, если серологическая диагностика проводилась в то время, когда еще не успели выработаться антитела.

Вариант латентного течения сифилиса в свою очередь требует особого внимания. Положительная серология в комплексе с отсутствием каких-либо видимых признаков инфекции создает проблему для врача.

Необходимо определить – это ложноположительный результат и есть сопутствующая патология, являющаяся тому причиной, или это скрытое течение сифилиса.

Детальное физикальное обследование – важный этап в диагностике сифилиса.

Каждый подобный клинический случай врач рассматривает индивидуально, так как есть необходимость решить главный вопрос – требуется ли лечение для данного больного.